Sodium citrátový pufr se často používá pro izolaci RNA, protože minimalizuje hydrolýzu bází RNA řetězců, čímž je neocenitelný pro čištění mRNA během genomický výzkumu a studiu transkripce. Pufry na bázi citrátů také pomáhají detekovat antigeny v preparátech fixovaných tkání, protože narušují zesítění vytvořená mezi antigeny a fixačními médii.
Pomocí následujících snadných kroků lze vytvořit citrát sodný pufr s pH 6 (kyselý) za méně než 10 minut.
Materiály pro citronan sodný
K přípravě pufru pro citrát sodný je zapotřebí jen málo materiálů. Kyselina citronová potřebuje pouze 1M hydroxid sodný, destilovanou vodu a kalibrovanou sondu pH. Citrát sodný je volitelný.
Výroba pufru také vyžaduje odměrný válec o objemu 1 litr, odměrnou baňku o objemu 1 litr a tři lahve o objemu 1 litr. Nakonec budete potřebovat magnetickou míchací tyč a magnetické míchadlo. Všechny tyto materiály najdete ve škole, laboratoře na pracovišti nebo je možné zakoupit online nebo v obchodech se zvláštním zbožím.
Dvě možnosti k vytvoření vyrovnávací paměti
V závislosti na dostupných materiálech existují dva způsoby, jak vyrobit pufry citronanu sodného.
- Pokud máte jak kyselinu citronovou, tak konjugovanou bázi, vytvořte zásobní roztok každého z nich smícháním 21 gramů kyseliny citronové v 1 litru destilované vody a 29,4 g citranu sodného v 1 litru destilované vody voda.
- Pokud máte po ruce pouze kyselinu citronovou, promíchejte 2,1 gramu v 1 litru destilované vody.
Míchání roztoků kyseliny citronové a citronanu sodného
Smíchejte 82 mililitrů roztoku kyseliny citronové s 18 mililitry roztoku citranu sodného. K tomu přidejte dostatek destilované vody, aby byl objem směsi mírně pod 1 litr.
Úprava pH
Za mírného míchání roztoku magnetickým míchadlem se pomocí 1M hydroxidu sodného upraví pH směsi na 6,0. Poté pomocí odměrné baňky přidejte více destilované vody, aby byl celkový celkový objem roztoku přesně 1 litr.