Pufrovací roztoky jsou kapaliny na bázi vody, které obsahují jak slabou kyselinu, tak její konjugovanou bázi. Díky své chemii mohou pufrovací roztoky udržovat pH (kyselost) na téměř konstantní úrovni, i když dochází k chemickým změnám. Pufrovací systémy se vyskytují v přírodě, ale jsou také velmi užitečné v chemii.
Použití pro řešení pufrů
V organických systémech udržují přírodní pufrovací roztoky pH na konstantní úrovni, což umožňuje biochemické reakce bez poškození organismu. Když biologové studují biologické procesy, musí udržovat stejné konzistentní pH; k tomu použili připravené pufrové roztoky. Tlumivé roztoky byly poprvé popsány v roce 1966; dnes se používá mnoho stejných vyrovnávacích pamětí.
Aby byly užitečné, musí biologické pufry splňovat několik kritérií. Konkrétně by měly být rozpustné ve vodě, ale nerozpustné v organických rozpouštědlech. Neměli by být schopni procházet buněčnými membránami. Kromě toho musí být netoxické, inertní a stabilní během všech experimentů, pro které jsou použity.
Tlumivé roztoky se přirozeně vyskytují v krevní plazmě, a proto si krev udržuje konzistentní pH mezi 7,35 a 7,45. Tlumicí roztoky se používají také v:
- fermentační procesy
- umírající textilie
- chemický rozbor
- kalibrace pH metrů
- Extrakce DNA
Co je Tris Buffer Solution?
Tris je zkratka pro tris (hydroxymethyl) aminomethan, chemickou sloučeninu, která se často používá ve fyziologickém roztoku, protože je izotonická a netoxická. Protože má Tris pKa 8,1 a pH v rozmezí 7 až 9, Tris pufrové roztoky se také běžně používají v řadě chemických analýz a postupů, včetně extrakce DNA. Je důležité vědět, že pH v roztoku pufru tris se mění s teplotou roztoku.
Jak připravit Tris Buffer
Je snadné najít komerčně dostupné řešení tris pufru, ale je možné si ho vyrobit pomocí vhodného vybavení.
Materiály:
Vypočítejte množství každé položky, které potřebujete, na základě molární koncentrace požadovaného roztoku a množství potřebného pufru.
- tris (hydroxymethyl) aminomethan
- destilovaná deionizovaná voda
- HCI
Postup:
- Začněte stanovením, jaké koncentrace (molarita) a objem Tris bufferu, který chcete vytvořit. Například Tris pufrový roztok používaný pro fyziologický roztok se pohybuje od 10 do 100 mM. Jakmile se rozhodnete, co děláte, vypočtěte počet molů Tris, které jsou vyžadovány vynásobením molární koncentrace pufru objemem vytvořeného pufru. (mol Tris = mol / L x L)
- Dále určete, kolik gramů Tris je vynásobením počtu mol molární hmotností Tris (121,14 g / mol). gramy Tris = (mol) x (121,14 g / mol)
- Rozpusťte Tris do destilované deionizované vody, 1/3 až 1/2 požadovaného konečného objemu.
- Míchá se v HCI (např. 1M HCI), dokud se nedosáhne pH metr poskytuje požadované pH pro váš pufrovací roztok Tris.
- Pufr se zředí vodou tak, aby se dosáhlo požadovaného konečného objemu roztoku.
Jakmile je roztok připraven, může být skladován po dobu měsíců na sterilním místě při pokojové teplotě. Tris-pufrový roztok má dlouhou skladovatelnost, protože roztok neobsahuje žádné proteiny.