Použití siRNA v molekulárním genetickém výzkumu

siRNA, což je zkratka pro malou interferující ribonukleovou kyselinu, je třídou dvouřetězcových molekul RNA. To je někdy známé jako krátká interferující RNA nebo umlčující RNA.

Malé interferující RNA (siRNA) jsou malé kousky dvouvláknové (ds) RNA, obvykle asi 21 nukleotidů dlouhé, s 3 '(výraznými třemi prvočíselnými) převisy (dva nukleotidy) na každém konci, které lze použít k "interferenci" s translací proteinů vazbou a podporou degradace messengerové RNA (mRNA) na specifických sekvence.

Funkce siRNA

Před ponořením do toho, co přesně siRNA je (nemělo by se zaměňovat) miRNA), je důležité znát funkci RNA. Ribonukleová kyselina (RNA) je nukleová kyselina přítomná ve všech živé buňky a funguje jako posel nesoucí pokyny od DNA pro řízení syntézy proteiny.

U virů mohou RNA a DNA přenášet informace.

Přitom siRNA brání produkci specifických proteinů na základě nukleotidových sekvencí jejich odpovídající mRNA. Tento proces se nazývá RNA interference (RNAi) a může být také označován jako umlčení siRNA nebo knockdown siRNA.

instagram viewer

Odkud pocházejí

siRNA se obecně považuje za pocházející z delších řetězců exogenního růstu nebo pocházejících z vnějšku organismu (RNA, která je pohlcena buňkou a podléhá dalšímu zpracování).

RNA často pochází vektory, jako jsou viry nebo transpozony (gen, který může měnit pozice v genomu). Bylo zjištěno, že hrají roli při antivirové obraně, degradaci nadprodukované mRNA nebo mRNA, pro kterou byla translace přerušena, nebo při prevenci narušení genomické DNA transpozony.

Každé vlákno siRNA má 5 '(5-primární) fosfátovou skupinu a 3' hydroxylovou (OH) skupinu. Jsou produkovány z dsRNA nebo vlásenky se smyčkou RNA, která se po vstupu do buňky štěpí enzymem podobným RNase III, zvaným Dicer, pomocí RNázy nebo restrikční enzymy.

SiRNA je poté inkorporována do vícejednotkového proteinového komplexu zvaného RNAi-indukovaný umlčovací komplex (RISC). RISC „vyhledává“ vhodnou cílovou mRNA, kde siRNA poté odvíjí a, jak se věří, antisense Vlákno řídí degradaci komplementárního řetězce mRNA za použití kombinace endo- a exonukleázy enzymy.

Lékařské a terapeutické použití

Když se savčí buňka potýká s dvouřetězcovou RNA, jako je siRNA, může ji zaměnit za vedlejší produkt viru a iniciovat imunitní odpověď. Kromě toho může zavedení siRNA způsobit neúmyslné off-Targeting, kde mohou být napadeny a vyřazeny i jiné neohrožující proteiny.

Zavedení příliš velkého množství siRNA do těla může vést k nespecifickým událostem v důsledku vrozené imunitní odpovědi aktivace, ale vzhledem ke schopnosti porazit jakýkoli požadovaný gen, siRNA mají potenciál pro mnoho terapeutická použití.

Mnoho onemocnění lze potenciálně léčit inhibicí genové exprese, chemickou úpravou siRNA, aby se zlepšily jejich terapeutické vlastnosti. Některé vlastnosti, které by mohly být vylepšeny, jsou:

  • Vylepšená aktivita
  • Zvýšená stabilita séra a méně mimo cíl
  • Snížená imunologická aktivace

Návrh syntetické siRNA pro terapeutická použití se proto stal populárním cílem mnoha biofarmaceutických společností.

Podrobná databáze všech takových chemických modifikací je ručně kurována na siRNAmod, ručně kurovaná databáze experimentálně validovaných chemicky modifikovaných siRNA.

instagram story viewer