Lyofilizace, také známá jako lyofilizace, je proces používaný k zachování biologického materiálu odstraněním voda ze vzorku, která zahrnuje nejprve zmrazení vzorku a jeho následné sušení ve vakuu při velmi nízkých hodnotách teploty. Lyofilizované vzorky mohou být skladovány mnohem déle než neošetřené vzorky.
Proč se používá lyofilizace?
Lyofilizace nebo lyofilizace bakteriálních kultur, stabilizuje kultury pro dlouhodobé skladování a minimalizuje poškození, které může být způsobeno přísným sušením vzorku. Mnoho mikroorganismů dobře přežívá, když je lyofilizováno, a lze je po delší době skladování snadno rehydratovat a pěstovat v kultivačním médiu.
Lyofilizace se také používá v biotechnologie a biomedicínský průmysl k uchování vakcín, vzorků krve, čištěné proteinya další biologický materiál.
Tento krátký laboratorní postup lze použít s jakoukoli komerčně dostupnou mrazicí sušičkou, aby se zachovala vaše kolekce kultur.
Proces
Proces lyofilizace je ve skutečnosti aplikací fyzikálního jevu zvaného sublimace: přechod látky z pevného do plynného stavu, aniž by nejprve prošel kapalinou fáze. Během lyofilizace se voda ze zmrazeného vzorku odstraní jako vodní pára, aniž by se vzorek nejprve rozmrazil.
Obyčejné chyby
Jednou z nejčastějších chyb, pokud jde o lyofilizaci, je neznalost bodu tání vzorku, což ztěžuje výběr správného lyofilizátoru. Vaše vzorky se mohou během procesu roztavit. Další častou chybou je, že chladnější je lepší, když vymražujete na mrazničce typu polička. Během primárního sušení byste měli nastavit teplotu police těsně pod eutektickou teplotu vzorku. Mělo by být jen tolik tepla, aby se povzbudily molekuly vzorku, aby se pohybovaly - ale zabránily roztavení.
Třetí chybou je použití nesprávného vybavení pro vaše vzorky. Protože se lyofilizátory používají ve skupinovém nastavení, měli byste před zakoupením některého z nich znát následující:
- Kolik vlhkosti bude lyofilizováno
- Co je to vzorek (a eutektická teplota)
- Jak správně používat mrazničku
Pokud se jednotka nepoužívá správně, mohla by zničit všechny vzorky. Což nás přivádí k další běžné chybě: neudržování vakuové pumpy. Aby fungovala lyofilizace, musí být čerpadlo ve výborném provozním stavu. Provoz čerpadla s otevřeným balastem plynu 30 minut před a po procesu lyofilizace zvýší životnost čerpadla. Otevřením předřadníku plynu se zbaví nečistot z čerpadla, aby se zabránilo poškození vnitřních součástí. Olej v čerpadle byste měli často kontrolovat, zda neobsahuje zbarvení a částice, a podle potřeby olej vyměňte. Pravidelná výměna oleje udržuje čerpadlo během procesu sušení mrazem v optimálním vakuu.
A konečně může být velkou chybou mít nesprávné příslušenství pro lyofilizaci pro váš lyofilizační proces. Potřebujete vzorek zátky pod vakuem? Potom je požadována zastavovací komora. Mrazíte v baňkách mrazem? Pak nezapomeňte mít sušící komoru s porty.
Pokud se vyhnete výše uvedeným chybám, můžete poskytnout lepší péči o sušičku a čerpadlo a získat lepší vzorky, když se lyofilizuje.
Reference
Labconco News. "5 největších chyb v lyofilizačním procesu."